Linhas retas são proporções

Toda linha reta em pixel art tem a ver com o seu ângulo, e o ângulo vem de uma proporção. Uma linha 1:3 vai um pixel para o lado, depois três pixels para cima, depois um para o lado, três para cima de novo. Conte em voz alta: um, um dois três, um, um dois três. Uma linha 1:1 é feita de pixels que se tocam um a um, canto com canto: isso é 45 graus. No Aseprite você consegue isso segurando Shift enquanto arrasta com o lápis.
Abaixo de 45 graus a proporção se inverte: 1:2 vira 2:1, 1:3 vira 3:1. E a 2:1 é a que você precisa lembrar: é a linha do pixel art isométrico.
Por que a proporção precisa ser a mesma
Seu olho lê os degraus de uma linha. Quando todos os degraus têm o mesmo tamanho, a linha parece reta e limpa. Quando um degrau é maior ou menor, o olho vê um calombo e a linha parece quebrada. Por isso a gente escolhe uma proporção e segue com ela do começo ao fim.
Curvas e os três erros

- Duplos. Dois pixels lado a lado numa linha, onde um degrau diagonal bastaria. As partes de uma linha devem se tocar só pelo canto.
- Jaggies. Um pixel fora do lugar que quebra a linha.
- Ordem matemática. Ao longo de uma curva, os segmentos mudam um ou poucos pixels por vez: 3, 3, 2, 1, depois 2, 3, 4. Pule de 2 para 6 e depois para 1 e a curva quebra.
Pratique e depois desenhe as suas
Linhas são a habilidade mais básica do pixel art, e a mão aprende com repetição. Quanto mais, melhor. Quando a folha ficar fácil, feche o guia e desenhe as suas: um círculo, uma curva em S, uma linha num ângulo que você mesmo escolher. Depois confira com as três regras. É nesse momento que você para de copiar e começa a desenhar.